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NCG对育肥猪血清及肌肉中氨基酸水平的影响
更新时间:2021-10-18 关注:3176
精氨酸是动物机体内携带氮多的氨基酸,动物机体内的代谢会产生大量的氨,精氨酸可促进尿素循环,使血氨转换为尿素排出体外,以维持体内氮的平衡,其在动物的营养代谢及调控过程中起着重要的作用。 N-乙酰谷氨酸(NAG)是哺乳动物肝脏尿素循环必需的一种特殊的辅酶因子,同时也是微生物和植物内源精氨酸合成的第 一底物。但NAG在体内半衰期较短,N-氨甲酰谷氨酸(NCG)作为NAG的结构类似物,理化性质稳定,半衰期长,成本低,且添加NCG不会干扰日粮中其他碱性氨基酸的吸收。NCG可以作为内源精氨酸代谢激活剂,持续激活肠道中瓜氨酸的合成,促进精氨酸的内源合成。研究发现,外源添加NCG能提高母猪机体内瓜氨酸、脯氨酸和亮氨酸的含量。但此类研究在育肥猪上比较少。 本试验旨在研究日粮中添加不同水平NCG对育肥猪氨基酸含量的影响,探究其添加是否能够促进精氨酸的合成,从而促进尿素循环,改善机体内氨基酸平衡和蛋白质代谢,为在生产中合理使用NCG提供理论依据。 材料与方法 NCG(纯度≥97%)由亚太兴牧公司提供。氨基酸采用高效液相色谱-四级杆离子阱串联质谱仪测定。 试验动物由新疆天康畜牧科技有限公司玛纳斯商品猪育肥基地提供。选择420头日龄接近的“杜×长×大”三元杂交猪(70±3)kg,采用单因子完全随机设计分为4个处理,对照组饲喂基础日粮,其他3个试验组分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%和0.15%的NCG,每个处理3个重复,每个重复35头,保持性别的平衡。预饲期为3d,正试期为44d。 试验采取人工饲喂,自由采食不限饲。饲养管理遵循规模化猪场管理制度进行,定时清扫猪圈和消毒,并保证舍内清洁干燥、通风良好,室温控制在20~23℃。每天记录舍内温度,观察猪群采食情况、粪便及健康状况。发现病残猪现象及时剔除,剔除时需称重,并记录饲喂日期。试验日粮组成及营养水平(见表1): 血清中氨基酸浓度的测定 在正试期第44天早上称重后,每个处理随机挑选2头,每组6头于前腔静脉采取血液样品30mL,室温下静止1~2h,之后4℃、3000r/min条件下离心10min,分离血清,置于-20℃下保存。血清样本测定游离氨基酸稀释后使用。取标准品混标、待测样本50μL加50μL蛋白沉淀剂,混匀后13200r/min冷冻离心4min。取上清10μL,加50μL标记缓冲液混匀,瞬离。再加20μL衍生液混匀、瞬离后置55℃恒温衍生15min。衍生后样本置冰箱冷却后混匀瞬离,取50μL上机检测。 肌肉中氨基酸浓度的测定 采血后,每组随机挑选6头育肥猪进行屠宰,采取背长肌。肌肉样本测定氨基酸浓度采用酸水解的方式进行测定。取适量样本,加10mL6mol/L盐酸,充氮气保护,密封110℃消化21h。后取160μL消化液加200μL5mol/L的NaOH中和待用。取标准品混标、待测样本50μL加50μL缓冲液A,混匀后13200r/min冷冻离心4min。取上清10μL,加50μL缓冲液B混匀,瞬离。再加20μL衍生液混匀、瞬离后置55℃恒温衍生15min。衍生后样本置冰箱冷却后混匀瞬离,取50μL上机检测。1.5数据处理采用Excel和SPSS20.0软件进行整理和方差分析,对于差异显著的处理采用LSD法进行多重比较,结果以“平均值±标准误”表示。P<0.05为差异显著。
结果与分析
1.日粮添加不同含量NCG 对育肥猪血清氨基酸浓度的影响 由表2可知,日粮中添加不同含量的NCG,血清中的丝氨酸、组氨酸和谷氨酰胺浓度显著上升(P<0.05);日粮中添加0.1%的NCG,半胱氨酸浓度显著高于对照组(P<0.05);精氨酸和蛋氨酸浓度随着NCG添加量的升高呈现升高趋势,但差异不显著(P>0.05)。 2.日粮添加不同含量NCG 对育肥猪肌肉氨基酸浓度的影响 由表3可知,日粮中添加不同含量的NCG,肌肉中的氨基酸浓度均无显著差异(P>0.05),其中添加0.05%NCG组氨基酸浓度及总氨基酸浓度均比对照组高。必需氨基酸与非必需氨基酸之比为0.75,比对照组低0.08。 日粮添加不同含量NCG 对育肥猪血清氨基酸浓度的影响 精氨酸是动物机体内合成一氧化碳的唯 一前体物,精氨酸和一氧化碳都具有激活mTOR通路的功能,通过促进蛋白质的合成,达到促进生长的目的。NCG是精氨酸的衍生物,其价格低廉,且能够促进动物机体精氨酸的内源合成,终改善育肥猪生长性能,提高经济效益。血清中游离氨基酸含量在一定程度上可以反映动物体内氨基酸代谢功能,当饲粮氨基酸不能满足动物需要时,血清游离氨基酸含量偏低。 有研究表明,通过给哺乳仔猪每天灌服50~100mg/kg体重的NCG,血浆精氨酸浓度显著提高。周笑犁等研究表明,饲粮中添加0.1%NCG显著提高了环江香猪的平均日增重,降低了料重比;提高了粗蛋白质、粗脂肪和干物质的表观消化率;同时也显著提高了血浆碱性磷酸酶活性和总氨基酸、必需氨基酸、芳香族氨基酸、苯丙氨酸和蛋氨酸的浓度,降低了血浆尿素氮、血氨和低密度脂蛋白的浓度。 本研究在育肥猪饲粮中添加0.1%的NCG后,血清精氨酸浓度提高了8%,可能是因为添加适宜剂量的NCG能够促进机体内源性精氨酸的合成。必需氨基酸/非必需氨基酸比值是反映动物影响状况的重要指数。添加0.1%的NCG组育肥猪血清中总氨基酸和必需氨基酸含量增加,表明必需氨基酸的补给更充足,从而为机体蛋白质沉积和生长发育提供必需的物质来源,有利于机体氨基酸平衡及蛋白质沉积。 日粮添加不同含量NCG 对育肥猪肌肉氨基酸浓度的影响 猪肉中氨基酸的组成和含量是评定猪肉营养价值的重要指标,也是影响蛋白质营养价值的重要因素。蛋白质缺少某种必需氨基酸或某种必需氨基酸含量过低,会影响其他氨基酸的利用,进而也会降低蛋白质的利用率。肌肉中谷氨酸和天冬氨酸等酸性氨基酸在猪肉烹饪过程中形成鲜香味。 本研究结果发现,与对照组相比,添加0.05%的NCG,谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸和天冬氨酸的含量高于对照组,但差异不显著,这说明添加NCG对提高猪肉风味方面效果并不显著,具体机理暂不明确,有待进一步研究。
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